在羅伊氏乳桿菌中鑒定了一個II-A CRISPR-Cas9系統,并發現內源性Cas9(LrCas9)識別廣泛的原間隔鄰近基序(PAM)序列。我們對LrCas9進行了重編程,以獲得高效的基因缺失(95.46%)、點突變(86.36%)、大片段缺失(40 kb)和基因整合(1743 bp,73.9%),揭示了黏液結合蛋白中重復保守結構域的功能。并通過基因缺失、點突變和基因整合,成功地驗證和優化了內源性LrCas9的功能

參考文獻:Guo Q, Yan Y, Zhang Z, Xu B, Bangash HL, Sui X, Yang Y, Zhou Z, Zhao S, Peng N. Developing the Limosilactobacillus reuteri Chassis through an Endogenous Programmable Endonuclease-Based Genome Editing Tool. ACS Synth Biol. 2023 Nov 17;12(11):3487-3496.