以意大利青霉基因組DNA為模板擴(kuò)增PicreA基因上下游同源臂，以Kn1質(zhì)粒為模板擴(kuò)增neoR抗性基因，將敲除盒片段和目標(biāo)穿梭質(zhì)粒pCAMBIA3300經(jīng)SacⅠ/BamHⅠ雙酶切后，進(jìn)行T4酶連，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α中。

參考文獻(xiàn)：[1]王萌.意大利青霉中碳代謝抑制相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PiCreA功能研究[D].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)[2024-08-07].