產品概述
本制品提供了一種簡單、快速、高效的方法來濃縮病毒。無需超速離心,只需將病毒上清液與本制品按一定比例混合后放置,采用標準離 心機離心去除上清,重懸沉淀,即可獲得高濃度病毒液,濃縮倍數可達100 倍以上,可用于少量實驗樣品處理或者大規模病毒制備。本試劑盒可濃縮逆轉錄病毒、慢病毒、腺病毒等多種病毒,濃縮的病毒可用于感染實驗、DNA 或RNA 純化等。
產品組成
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Virus Concentrator |
100 ml |
保存及運輸
保存溫度:4 ℃ ;
運輸溫度:4 ℃ 。
注意事項
1. 整個操作過程應保持無菌操作。
2. 病毒沉淀時應保持低溫操作。
3. 如果使用0.45μm濾膜過濾含病毒的液體,推薦使用低蛋白結合的PES膜或PVDF膜。
4. 如果病毒包裝時死亡細胞較多,重懸沉淀時,會出現部分沉淀不溶的現象,這些成分不影響感染效率,無需離心去除。
實驗前準備
低溫離心機、0.45μm濾膜、無菌的DMEM、PBS或TNE溶液。
操作流程
1. 收集包含病毒的液體,500×g,4℃離心10 分鐘,或通過0.45μm 濾膜過濾病毒液,以去除細胞碎片。
2. 將澄清的病毒上清液轉移到新的無菌容器中,將 1 倍體積的本制品與 3 倍體積的病毒上清液輕輕顛倒混勻,確保混勻充分。
注:本制品較粘稠,需緩慢加入。
3. 將上述混合物在4℃孵育 30 分鐘至過夜。
注:對較大體積的病毒液進行濃縮(如:大于100 ml),則需要更長的孵育時間。
4. 1,500×g,4℃離心45 分鐘,離心后可見灰白色沉淀。
5. 小心去除上清,不要觸及沉淀。
6. 使用1/100 ~ 1/10 原病毒液體積的無菌的DMEM、PBS或TNE溶液將沉淀重新懸浮,獲得高滴度的病毒液。
7. 立即進行后續實驗或儲存于-80℃冰箱。
