從pACYC184中擴增出cat基因，從枯草芽孢桿菌中擴增出sacB基因，將PCR產物用 SacI酶切，然后用T4連接酶連接，然后和pEASY-Blunt連接得到pXZ-CS。galP和pck基因的表達由大腸桿菌pck啟動子突變體控制，從大腸桿菌中擴增得到PCK啟動子并將其克隆到pTrc99A得到pXZ602，對pXZ602進行擴增并自連接的大 pXZ603。

參考文獻：Tan Z, Zhu X, Chen J, Li Q, Zhang X. Activating phosphoenolpyruvate carboxylase and phosphoenolpyruvate carboxykinase in combination for improvement of succinate production. Appl Environ Microbiol. 2013 Aug;79(16):4838-44.