用BamHⅠ和HindⅢ雙酶切質粒pDG7和pUC19，膠回收pDG7小片段pMB1和pUC19大片段，連接構建大腸桿菌－長雙歧桿菌穿梭質粒pUB1。用BamHⅠ和HindⅢ雙酶切質粒pDG7后，膠回收pMB1，與經同樣雙酶切的pUC19連接，構建重組質粒pUB1，然后用BamHⅠ和SacⅠ雙酶切質粒pPS858，回收gfp基因，克隆到經同樣雙酶切的pUB1中，構建大腸桿菌－長雙歧桿菌穿梭表達質粒pUB2。

參考文獻：劉大偉,孫忠科,郭燕紅,等. 長雙歧桿菌NCC2705高效轉化系統的建立及GFP表達[J]. 生物技術通訊,2010,21(6):808-811.