用BamHⅠ和HindⅢ雙酶切質(zhì)粒pDG7和pUC19，膠回收pDG7小片段pMB1和pUC19大片段，連接構(gòu)建大腸桿菌－長(zhǎng)雙歧桿菌穿梭質(zhì)粒pUB1。用BamHⅠ和HindⅢ雙酶切質(zhì)粒pDG7后，膠回收pMB1，與經(jīng)同樣雙酶切的pUC19連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒pUB1，然后用BamHⅠ和SacⅠ雙酶切質(zhì)粒pPS858，回收gfp基因，克隆到經(jīng)同樣雙酶切的pUB1中，構(gòu)建大腸桿菌－長(zhǎng)雙歧桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pUB2。

參考文獻(xiàn)：劉大偉,孫忠科,郭燕紅,等. 長(zhǎng)雙歧桿菌NCC2705高效轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的建立及GFP表達(dá)[J]. 生物技術(shù)通訊,2010,21(6):808-811.