模塊化基因改造光合細(xì)菌構(gòu)建萜類光合成細(xì)胞工廠,分五步基因編輯改造菌株:
1. 篩選強(qiáng)啟動子、優(yōu)化 RBS 強(qiáng)化異源萜合酶表達(dá);
2. 過表達(dá) MEP 限速酶或?qū)氘愒?MVA 通路,擴(kuò)增 IPP、DMAPP 前體;
3. 上調(diào) IspA/CrtE 調(diào)控異戊烯焦磷酸中間體量;
4. 篩選高活性萜合酶;
5. 敲除角鯊烯、聚羥基丁酸等競爭通路,融合上下游酶定向引導(dǎo)碳流。
依托 CRISPRi、轉(zhuǎn)座子完成基因敲除 / 強(qiáng)化,利用光合菌內(nèi)膜儲存疏水萜類,配合光照參數(shù)調(diào)控光合產(chǎn)能,驅(qū)動 CO?/ 有機(jī)碳經(jīng)改造代謝通路持續(xù)合成各類藥用萜類。
五層菌株基因 / 代謝改造模塊
文獻(xiàn)來源:
Oliver Klaus, Fabienne Hilgers, Andreas Nakielski, Dennis Hasenklever, Karl-Erich Jaeger, Ilka M Axmann, Thomas Drepper,
Engineering phototrophic bacteria for the production of terpenoids,
Current Opinion in Biotechnology,
Volume 77,
2022,
102764,
ISSN 0958-1669
文獻(xiàn)鏈接:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0958166922000982?via%3Dihub