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工程化光合細(xì)菌以生產(chǎn)萜類

 模塊化基因改造光合細(xì)菌構(gòu)建萜類光合成細(xì)胞工廠,分五步基因編輯改造菌株:

1. 篩選強(qiáng)啟動子、優(yōu)化 RBS 強(qiáng)化異源萜合酶表達(dá);

2. 過表達(dá) MEP 限速酶或?qū)氘愒?MVA 通路,擴(kuò)增 IPP、DMAPP 前體;

3. 上調(diào) IspA/CrtE 調(diào)控異戊烯焦磷酸中間體量;

4. 篩選高活性萜合酶;

5. 敲除角鯊烯、聚羥基丁酸等競爭通路,融合上下游酶定向引導(dǎo)碳流。

依托 CRISPRi、轉(zhuǎn)座子完成基因敲除 / 強(qiáng)化,利用光合菌內(nèi)膜儲存疏水萜類,配合光照參數(shù)調(diào)控光合產(chǎn)能,驅(qū)動 CO?/ 有機(jī)碳經(jīng)改造代謝通路持續(xù)合成各類藥用萜類。

 

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       五層菌株基因 / 代謝改造模塊

 

 

文獻(xiàn)來源:

Oliver Klaus, Fabienne Hilgers, Andreas Nakielski, Dennis Hasenklever, Karl-Erich Jaeger, Ilka M Axmann, Thomas Drepper,

Engineering phototrophic bacteria for the production of terpenoids,

Current Opinion in Biotechnology,

Volume 77,

2022,

102764,

ISSN 0958-1669

文獻(xiàn)鏈接:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0958166922000982?via%3Dihub