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NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1]
NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1]
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-0134
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產(chǎn)品名稱 NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1]
商品貨號 MZ-0134
中文名稱 大鼠肺泡巨噬細胞
細胞數(shù)量 1*10^6
組織來源 巨噬細胞;自發(fā)永生;SD大鼠
細胞種屬 rattus norvegicus, rat
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
生長特性 mixed, adherent and suspension
培養(yǎng)基 Ham's F-12K+20% heat-inactivated FBS+1% P/S
形態(tài)特征 macrophage
傳代方法 Cultures can be maintained by Transferring floating cells-additional flasks. Adherent cells may be harvested by scraping. Upon reseeding, about one half of the cells will re-attach. Cultures are most successful when set up at a floating cell concentration
細胞描述 NR8383(正常大鼠,1983年8月3日)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現(xiàn)出巨噬細胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,F(xiàn)c受體,氧化降解;分泌IL-1,TNFbeta和IL-6,可重復地響應外源生長因子。NR8383細胞響應博萊霉素,分泌TGFbeta前體。在博萊霉素刺激下,TGFbe
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中
復蘇細胞步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 :待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞凍存 Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase
細胞運輸 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25細胞瓶)
姓名 手機號(微信同號) QQ
梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
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