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產(chǎn)品名稱

BALB/3T3 clone A31

商品貨號

MZ-0270

中文名稱

小鼠胚胎成纖維細胞

細胞數(shù)量

1*10^6

組織來源

胚胎；成纖維；自發(fā)永生；雄性；BALB/c

細胞種屬

mus musculus, mouse

細胞污染

HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

培養(yǎng)基

MCM-0477：BALB/3T3 clone A31細胞專用培養(yǎng)基

形態(tài)特征

epithelial

傳代方法

1:2-1:3

細胞運輸

干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸（T25細胞瓶）

細胞凍存

Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase

生長特性

adherent

細胞描述

The cells are extremely sensitive to contact inhibition of cell division, grow at a high dilution, exhibit a low saturation density and are highly susceptible to transformation in tissue culture by the oncogenic DNA virus, SV40, and murine sarcoma virusTested and found negative for ectromelia virus(mousepox).

細胞傳代步驟

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中

復蘇細胞步驟

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟

：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

MZ-0425：HET-1A

MZ-0423：HCT116-GFP

MZ-0421：HCC1588

MZ-0422：GIST-T1

MZ-0419：DMS 454

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