特征特性
人尿道成纖維細(xì)胞是尿道壁結(jié)締組織中的主要細(xì)胞成分,屬于間充質(zhì)來源細(xì)胞,在尿道生理結(jié)構(gòu)維持、損傷修復(fù)及病理瘢痕形成中發(fā)揮核心作用。生理功能包括二個(gè)方面:1、結(jié)構(gòu)支撐作用,合成并維持尿道壁的細(xì)胞外基質(zhì),為尿道提供機(jī)械強(qiáng)度和彈性,確保尿道形態(tài)穩(wěn)定;參與構(gòu)成尿道海綿體的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),支撐尿道上皮和平滑肌組織。2、調(diào)節(jié)與修復(fù)功能,分泌 FGF-7 等生長因子,促進(jìn)尿道上皮細(xì)胞增殖和分化,維持尿道黏膜完整性;在尿道輕微損傷時(shí),通過增殖和基質(zhì)重塑參與組織修復(fù),維持尿道正常功能;與尿道平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞相互作用,調(diào)節(jié)尿道收縮和舒張功能。
細(xì)胞凍存步驟
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。明舟生物按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。