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人小細胞肺癌細胞

1*10^6

65歲 白人 肺 胸腔積液

多細胞聚集體樣，懸浮生長

HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

注意：可以通過添加或更換新鮮培養基來維持培養物。開始培養時為2 * 10^5 細胞/mL，并保持在1 * 10^5到1 * 10^6 細胞/mL之間。由于細胞以團塊形式生長，細胞計數是近似的。 2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。分瓶比例：1:2，換液頻率：每周2到3次

Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。