特征特性
胃黏膜上皮細胞具有很高的更新速度,各種上皮細胞具有不同的代謝周期,處于一種動態(tài)的、精致的平衡之中。胃粘膜由許多胃單位構(gòu)成的,每個胃單位由頂細胞、壁細胞、主細胞、頸粘液細胞、多能干細胞以及少量的內(nèi)分等多種上皮細胞組成,其中頂細胞、壁細胞、主細胞是胃粘膜最主要的三種細胞。各種上皮細胞均來源于峽部的多能干細胞,每種細胞具有不同的功能和更新速率。細胞分化、增殖和凋亡的改變直接影響到胃粘膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定,是導(dǎo)致胃相關(guān)疾病發(fā)生的原因。
細胞凍存步驟
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。