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中國成年病人手術后的前列腺癌組織

5×105cells/T25培養瓶

貼壁

HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

前列腺癌病理分期與臨床分期密切相關，因為病理分期是以臨床分期作為基礎的，只在分期 前加P 即可。四種分期系統為ABCD 系統、TNM 系統、OSCC 系統和超聲分期系統。四種 中以TNM 系統分期最為詳細，且為國際抗癌協會推薦使用病理分期系統，故介紹如下： (1)T 指原發腫瘤的有無。 PTx：無法估測原發腫瘤。 PT0：無原發腫瘤的證據。 PT1：臨床檢查沒發現腫瘤而病理檢查有癌。 PT1a：在切除的前列腺組織中發現有癌，癌的體積小于或等于切除組織的5%。 PT1b：在切除的前列腺組織中病理檢查發現癌，癌的體積大于切除組織的5%。 PT1c：前列腺穿刺活檢證實有癌。 PT2：腫瘤局限于前列腺內。 PT2a：腫瘤侵犯前列腺的一葉的1/2 或更少。 PT2b：腫瘤侵犯前列腺一葉的1/2 以上，但小于兩葉。 TP2c：腫瘤侵犯前列腺的兩葉。 PT3：腫瘤經過前列腺的被膜向外延伸。 PT3a：單側被膜外延伸。 PT3b：雙側被膜外延伸。 PT3c：腫瘤侵犯精囊。 PT4：腫瘤侵犯除精囊外的鄰近組織并與之固定。 PT4a：腫瘤侵犯膀胱頸和(或)外括約肌和(或)直腸。 PT4b：腫瘤侵犯肛提肌和(或)與盆壁固定。

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。